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              產品展示

              當前位置:首頁產品展示技術服務病理形態學檢測組織免疫組化(IHC)

              組織免疫組化(IHC)

              產品簡介:組織免疫組化(IHC)是以酶底物的顯色反應對抗原進示蹤,并對呈色反應后的免疫陽性物做半定量分析。組織免疫熒光(IF)是通過熒光抗體與細胞表面抗原的特異性結合后,于熒光顯微鏡下觀察,可見明亮的特異熒光,即可對標本中的抗原物質進行鑒定。
              周期:免疫組化1-2周,免疫熒光-普通熒光顯微鏡觀察1-2周(≤50個樣本),免疫熒光-共聚焦熒光顯微鏡3周(≤20個樣本)。

              產品型號:

              更新時間:2021-10-09

              廠商性質:生產廠家

              訪 問 量 :2506

              服務熱線

              021-51216810

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              組織免疫組化(IHC) 

              實驗方法

              1)石蠟切片自37℃恒溫箱過夜烤片后取出,室溫放置5分鐘后,雙蒸水浸泡5分鐘,0.01M PBS(pH7.2-7.4)浸洗5分鐘×3次。

              2)加入EDTA緩沖液,微波至沸騰拿出微波爐,自然冷卻至室溫。

              3)0.1% triton X-100透膜10分鐘。PBS洗三次。

              4)3%過氧化氫(in PBS)RT,15min。重復此步驟操作1次。

              5)用吸水紙擦干組織周圍的玻片,用組化筆畫圈,滴加免疫羊血清封閉30分鐘(室溫)或過夜(4℃)。

              6)傾去封閉血清,不用清洗,直接滴加稀釋好的一抗,4℃濕盒過夜。次日取出,傾去一抗,PBS清洗三次。

              7)滴加稀釋的二抗,37℃孵育1h。傾去二抗,PBS清洗3遍。

              8)加DAB顯色劑,每樣加上100ulDAB,5-20s內顯微鏡下觀察有無特異性信號。顯色后立即用蒸餾水沖洗終止反應。如無特異性表達可適當延長DAB顯色時間。

              9)蘇木精染色液復染,蒸餾水洗2min,蘇木精復染10s-15min,蒸餾水洗,鹽酸酒精(70%乙醇:鹽酸=99:1)分化20s,蒸餾水洗,稀氨水(1%)反藍10s。流水沖洗,鏡下觀察。

              10)脫水透明,95%乙醇5min,100%乙醇5min,2次(2瓶無水乙醇).二甲苯Ⅰ10min二甲苯Ⅱ10min。封片,中性樹膠封片。

              實驗周期:組織免疫組化(IHC)1-2周,組織免疫熒光(IF)-普通熒光顯微鏡觀察1-2周(≤50個樣本),組織免疫熒光(IF)-共聚焦熒光顯微鏡3周(≤20個樣本)。


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              ......

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